涂片革兰染色是一种常用的微生物学实验技术,用于区分细菌为革兰氏阳性菌(Gram-positive bacteria)或革兰氏阴性菌(Gram-negative bacteria)。这种染色方法是由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰德(Hans Christian Gram)在1884年发明的。
具体操作步骤如下:
1. 涂片:将细菌样品涂抹在载玻片上,干燥后进行固定。
2. 初染:使用结晶紫染液对涂片进行染色,使所有细菌染成紫色。
3. 媒染:用碘液处理涂片,使结晶紫染液与细菌细胞壁中的肽聚糖结合,形成复合物。
4. 脱色:用酒精或醋酸乙醇溶液对涂片进行脱色处理。革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,肽聚糖含量高,不易被酒精脱色,因此仍保持紫色;而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,肽聚糖含量低,容易被酒精脱色,变成无色。
5. 复染:用番红染液对脱色后的涂片进行复染,革兰氏阴性菌被染成红色,革兰氏阳性菌仍保持紫色。
通过观察涂片,可以判断细菌的革兰氏分类,这对临床诊断、疾病治疗和病原菌鉴定具有重要意义。